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產(chǎn)品中心產(chǎn)品介紹
REH 人急性非B非T淋巴細胞白血病細胞特性
1) 來源:白血病
2) 形態(tài):淋巴母細胞樣,懸浮生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式
(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;
(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
(3)收到細胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。
細胞用途:僅供科研使用。
REH 人急性非B非T淋巴細胞白血病細胞接收后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2) 在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時,在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在10X和20×物鏡下,同時給剛收到的細胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。
4) 貼壁細胞:在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。
5) 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基)。
6)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后di一次傳代建議1:2傳代 。
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640(推薦iCell-128-0002 含NaHCO3 1.5g/L)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 注意:這個細胞對1640培養(yǎng)基中碳酸氫na的含量需求是1.5g/L,購買和準備培養(yǎng)基的時候要注意碳酸氫na的含量。過多的碳酸氫na不利于細胞的生長。
3) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
4) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至6ml。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注:di一次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。
下面T25瓶為類;
1,細胞凍存時,取上清,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min ,1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產(chǎn)品和技術服務:
一、原代細胞服務
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源;
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源;
原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等;
原代細胞相關技術服務和整體實驗外包服務;
二、細胞株/系服務
細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關說明書;
細胞系培養(yǎng)過程的技術指導;
細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等;
三、iPS細胞
iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在);
iPS細胞增殖及冷凍保存;
iPS基礎培養(yǎng)技術實習;
新藥及實驗儀器上市前評估;
四、技術外包服務:各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗、顯微鏡拍照服務等
五、其他:根據(jù)客戶需要定制服務等
序號 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 售價 | 備注 |
1 | 培養(yǎng)基1640 | icell-0002 | 500ml | 140 |
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2 | 培養(yǎng)基DMEM | icell-0001 | 500ml | 140 |
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3 | 培養(yǎng)基DMEM/F12 | icell-0005 | 500ml | 140 |
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4 | 內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基ECMsciencel | icell-0016 | 500ml | 2280 |
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5 | 動物上皮細胞培養(yǎng)基Epicm-a | icell-0015 | 500ml | 1980 |
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6 | 上皮細胞培養(yǎng)基Epicm | icell-0017 | 500ml | 1980 |
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7 | Mccoy’s 5A 培養(yǎng)基 | icell-0011 | 500ml | 160 |
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8 | MEM培養(yǎng)基 | icell-0012 | 500ml | 140 |
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9 | FBS北美胎牛血清 | GIBCO 16000-044 | 500ml | 6800 |
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10 | FBS墨西哥胎牛血清 | 10437-028 | 500ml | 5616 |
|
11 | 馬血清 | gibco.16050122 | 500ml | 1489 |
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12 | DMSO | sigma-D2650 | 100ml | 1520 |
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13 | PBS片劑(1000ml) | 09-9400-100 | 100片 | 4170 |
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14 | PS雙抗(進口) | 15140-122 | 100ml | 452 |
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15 | yi蛋白酶 | 25200-072 | 500ml | 665 |
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