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16674676768您的位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 細胞分類 > 細胞系 > NCI-H1975細胞NCI-H1975 人肺腺癌細胞/STR鑒定
產(chǎn)品中心產(chǎn)品介紹
NCI-H1975 人肺腺癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)介紹
這株細胞于1988年七月建株,組織提供者是一位非吸煙人士。
鏡像綺點( 上海 )生物技術(shù)股份有限公司( iCell Bioscience Inc,Shanghai )是一家專注于研發(fā)生產(chǎn)高品質(zhì)人體組織源及動物組織源原代細胞、細胞系、iPS細胞等產(chǎn)品,并提供專業(yè)技術(shù)服務(wù)外包的技術(shù)企業(yè),公司總部位于上海。
細胞特性
1) 來源:器官: 肺 疾病: 腺癌;非小細胞肺癌
2) 形態(tài):上皮細胞樣
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
細胞用途:僅供科研使用。
NCI-H1975 人肺腺癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)接受后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的*培養(yǎng)基。
4) 如果細胞長滿(80%-90%)請及時進行細胞傳代。
5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注:*次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量yi酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1mlyi酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點(上海)細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和服務(wù)介紹:
一、原代細胞服務(wù):
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等
原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)及整體實驗外包服務(wù)
二、細胞系服務(wù):
細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關(guān)說明書
細胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導(dǎo)
細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關(guān)生長因子、試劑等
三、iPS細胞服務(wù):
iPS細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習(xí)
新藥及實驗儀器上市前評估
四、其他技術(shù)外包服務(wù)、客戶定制服務(wù)等
鏡像綺點(上海)細胞技術(shù)有限公司
相關(guān)產(chǎn)品
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