服務熱線
400-021-2021
歡迎訪問鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司網站
16674676768產品介紹
GES-1 人胃黏膜上皮細胞/STR鑒定
描述
該細胞是從9個月的胎兒胃上皮細胞中培養(yǎng)分離出來,經過SV40病毒轉染后,篩選獲得。不能在裸鼠中成瘤,是在研究人胃腫瘤過程中一種重要的模式系統。
細胞特性
1) 來源:胃
2) 形態(tài):上皮樣,貼壁細胞
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:
(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;
(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
(3)收到細胞后請拍照,3天內如果發(fā)現污染,請及時拍照與我們聯系。
細胞用途:僅供科研使用。
GES-1 人胃黏膜上皮細胞/STR鑒定
接收后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 將T25瓶中的細胞培養(yǎng)基離心后,去上清,添加6ml*培養(yǎng)基,加入新的T25瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
4) 如果細胞長滿80%請及時進行細胞傳代.
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備DMEM培養(yǎng)基;北美胎牛血清,10%;2 mM glutamine(谷an酰胺);1 mM pyruvate(丙酮酸鹽); 50 μM 2-mercaptoethanol(巰基乙醇);雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存細胞:凍存細胞時,用FBS重懸細胞,然后加入一定量的DMSO,輕輕混合均勻后移入到凍存管中,DMSO終濃度為10%。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至6ml。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3. 輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4 . 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據實際情況按1:2到1:4的比例進行。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。
下面T25瓶為類;
1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1-2mlyi酶(含EDTA),細胞變圓脫落后,加入2-3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和等體積的凍存液,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產品和服務介紹:
一、原代細胞服務:
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等
原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務
二、細胞系服務:
細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關說明書
細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等
三、iPS細胞服務:
iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養(yǎng)技術實習
新藥及實驗儀器上市前評估
四、其他技術外包服務、客戶定制服務等
鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司
相關產品
鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司地址:上海市奉賢區(qū)茂園路260號臨港南橋科技城56號樓7層 郵箱:3352341519@qq.com
公司版權所有 © 2024 備案號:滬ICP備2024064724號-1 管理登陸 技術支持:化工儀器網 GoogleSitemap