服務(wù)熱線
400-021-2021
歡迎訪問鏡像綺點(diǎn)(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司網(wǎng)站
16674676768您的位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 細(xì)胞分類 > 細(xì)胞系 > A3A3 人淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞/STR鑒定
產(chǎn)品中心產(chǎn)品介紹
A3 人淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞/STR鑒定介紹
A3亞克隆來自Jurkat細(xì)胞系。用Fas抗體處理Jurkat細(xì)胞,用有限稀釋法獲得一個(gè)細(xì)胞系,此細(xì)胞系對(duì)Fas介導(dǎo)的凋亡產(chǎn)生自發(fā)抗性的比例較低。得到的亞克隆對(duì)Fas-介導(dǎo)的凋亡十分敏感。挑選對(duì)新霉素具有抗性的野生型A3細(xì)胞,并三次用移碼突變誘變劑ICR-191進(jìn)行處理以分離具有抗Fas抗體殺傷的隱性突變體。
細(xì)胞特性
1) 來源:T細(xì)胞白血病,T淋巴細(xì)胞
2) 形態(tài):淋巴母細(xì)胞,懸浮生長
3) 含量:>1x106
4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存
可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式
(1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇;
(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
(3)收到細(xì)胞后請(qǐng)拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請(qǐng)及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。
細(xì)胞用途:僅供科研使用。
A3 人淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞/STR鑒定接收后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2) 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時(shí),在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X和20×物鏡下,同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細(xì)胞需要售后時(shí)提供收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。
4) 貼壁細(xì)胞:在運(yùn)輸過程中貼壁細(xì)胞會(huì)有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。
5) 懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基)。
6)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后di一次傳代建議1:2傳代 。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640(推薦iCell-0002)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
每2至3天添加一次新鮮培養(yǎng)基(取決于細(xì)胞密度),換液可以通過添加新鮮培養(yǎng)基或更換培養(yǎng)基來維持?;蛘撸梢酝ㄟ^離心來維持,隨后以3至5×105個(gè)活細(xì)胞/ mL重新懸浮于新鮮培養(yǎng)基中。保持細(xì)胞濃度在2×105和2×106活細(xì)胞/ mL之間。
1,收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,*傳代推薦將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議客戶凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。
下面以T25瓶為類,
1,細(xì)胞凍存時(shí),取上清,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2,4min ,1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點(diǎn)(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù):
一、原代細(xì)胞服務(wù)
各類模式哺乳動(dòng)物的多種原代細(xì)胞資源;
多種人源性正常及腫瘤原代細(xì)胞資源;
原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等;
原代細(xì)胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實(shí)驗(yàn)外包服務(wù);
二、細(xì)胞株/系服務(wù)
細(xì)胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關(guān)說明書;
細(xì)胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導(dǎo);
細(xì)胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關(guān)生長因子、試劑等;
三、iPS細(xì)胞
iPS細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在);
iPS細(xì)胞增殖及冷凍保存;
iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實(shí)習(xí);
新藥及實(shí)驗(yàn)儀器上市前評(píng)估;
四、技術(shù)外包服務(wù):各類細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、顯微鏡拍照服務(wù)等
五、其他:根據(jù)客戶需要定制服務(wù)等
序號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 售價(jià) | 備注 |
1 | 培養(yǎng)基1640 | icell-0002 | 500ml | 140 |
|
2 | 培養(yǎng)基DMEM | icell-0001 | 500ml | 140 |
|
3 | 培養(yǎng)基DMEM/F12 | icell-0005 | 500ml | 140 |
|
4 | 內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基ECMsciencel | icell-0016 | 500ml | 2280 |
|
5 | 動(dòng)物上皮細(xì)胞培養(yǎng)基Epicm-a | icell-0015 | 500ml | 1980 |
|
6 | 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基Epicm | icell-0017 | 500ml | 1980 |
|
7 | Mccoy’s 5A 培養(yǎng)基 | icell-0011 | 500ml | 160 |
|
8 | MEM培養(yǎng)基 | icell-0012 | 500ml | 140 |
|
9 | FBS北美胎牛血清 | GIBCO 16000-044 | 500ml | 6800 |
|
10 | FBS墨西哥胎牛血清 | 10437-028 | 500ml | 5616 |
|
11 | 馬血清 | gibco.16050122 | 500ml | 1489 |
|
12 | DMSO | sigma-D2650 | 100ml | 1520 |
|
13 | PBS片劑(1000ml) | 09-9400-100 | 100片 | 4170 |
|
14 | PS雙抗(進(jìn)口) | 15140-122 | 100ml | 452 |
|
15 | 胰蛋白酶 | 25200-072 | 500ml | 665 |
|
相關(guān)產(chǎn)品
鏡像綺點(diǎn)(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司地址:上海市奉賢區(qū)茂園路260號(hào)臨港南橋科技城56號(hào)樓7層 郵箱:3352341519@qq.com
公司版權(quán)所有 © 2024 備案號(hào):滬ICP備2024064724號(hào)-1 管理登陸 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) GoogleSitemap