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產(chǎn)品中心產(chǎn)品介紹
CEM/C1 人急性淋巴細胞白血病細胞介紹
CEM/C1是人T細胞白血病細胞株CCRF-CEM具有喜樹堿抗性的衍生株。1991年細胞株選擇并亞克隆了對CPT的抗性。細胞表現(xiàn)出對CPT類似物水溶性的托泊替康和非水溶性的9-氨基-CPT及10,11-亞甲二氧基-CPT具有交叉抗性。 CEM/C1細胞對CPT的敏感性較母系CEM細胞低31倍。 CEM/C1細胞表現(xiàn)非典型的多藥抗性和轉(zhuǎn)換拓補異構(gòu)酶I催化活性。對CPT的抗性維持6個月以上。
細胞特性
1) 來源:器官: 外周血 疾病: 急性淋巴細胞白血病 細胞類型: T 淋巴母細胞
2) 形態(tài):淋巴母細胞,懸浮生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式
(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;
(2)存活細胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
(3)收到細胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。
細胞用途:僅供科研使用。
細胞接收后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2) 在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時,在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在10X和20×物鏡下,同時給剛收到的細胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。
4) 貼壁細胞:在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。
5) 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基)。
6)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后di一次傳代建議1:2傳代 。
CEM/C1 人急性淋巴細胞白血病細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640(推薦iCell-0002)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至6ml。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%,即可進行傳代培養(yǎng)。維持細胞密度在1 x 105 到2 x 106 /mL,每2到3天換液,換液可通過添加幾毫升新鮮培養(yǎng)基或離心之后去上清液,添加新培養(yǎng)基重懸培養(yǎng)。
1. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進行。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。
下面T25瓶為例;
1,細胞凍存時,取上清,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min ,1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點(上海)細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù):
一、原代細胞服務(wù)
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源;
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源;
原代細胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等;
原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實驗外包服務(wù);
二、細胞株/系服務(wù)
細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關(guān)說明書;
細胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導(dǎo);
細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關(guān)生長因子、試劑等;
三、iPS細胞
iPS細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在);
iPS細胞增殖及冷凍保存;
iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習;
新藥及實驗儀器上市前評估;
四、技術(shù)外包服務(wù):各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗、顯微鏡拍照服務(wù)等
五、其他:根據(jù)客戶需要定制服務(wù)等
序號 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 售價 | 備注 |
1 | 培養(yǎng)基1640 | icell-0002 | 500ml | 140 |
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2 | 培養(yǎng)基DMEM | icell-0001 | 500ml | 140 |
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3 | 培養(yǎng)基DMEM/F12 | icell-0005 | 500ml | 140 |
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4 | 內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基ECMsciencel | icell-0016 | 500ml | 2280 |
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5 | 動物上皮細胞培養(yǎng)基Epicm-a | icell-0015 | 500ml | 1980 |
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6 | 上皮細胞培養(yǎng)基Epicm | icell-0017 | 500ml | 1980 |
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7 | Mccoy’s 5A 培養(yǎng)基 | icell-0011 | 500ml | 160 |
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8 | MEM培養(yǎng)基 | icell-0012 | 500ml | 140 |
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9 | FBS北美胎牛血清 | GIBCO 16000-044 | 500ml | 6800 |
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10 | FBS墨西哥胎牛血清 | 10437-028 | 500ml | 5616 |
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11 | 馬血清 | gibco.16050122 | 500ml | 1489 |
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12 | DMSO | sigma-D2650 | 100ml | 1520 |
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13 | PBS片劑(1000ml) | 09-9400-100 | 100片 | 4170 |
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14 | PS雙抗(進口) | 15140-122 | 100ml | 452 |
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15 | 胰蛋白酶 | 25200-072 | 500ml | 665 |
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相關(guān)產(chǎn)品
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