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產(chǎn)品中心
產(chǎn)品名稱:

PC-3 人前列腺癌細胞/STR鑒定

產(chǎn)品型號: PC-3細胞
產(chǎn)品時間: 2024-12-18
描述:PC-3 人前列腺癌細胞/STR鑒定
細胞介紹
PC-3源于一位62歲白人男性前列腺腺癌患者的骨轉(zhuǎn)移灶,細胞的酸性磷酸酶活性和5-α-睪丸激素還原酶活性都較低。
細胞特性
1) 來源:前列腺,骨轉(zhuǎn)移
2) 形態(tài):上皮細胞樣
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

產(chǎn)品介紹

PC-3 人前列腺癌細胞/STR鑒定

細胞介紹

PC-3源于一位62歲白人男性前列腺腺癌患者的骨轉(zhuǎn)移灶,細胞的酸性磷酸酶活性和5-α-睪丸激素還原酶活性都較低。

細胞特性

1) 來源:前列腺,骨轉(zhuǎn)移

2) 形態(tài):上皮細胞樣 貼壁生長

3) 含量:>1x10^6  細胞數(shù)

4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復(fù)蘇好存活細胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完quan培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完quan培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。  

PC-3 人前列腺癌細胞/STR鑒定

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備F12K(推薦iCell-0007)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二.細胞處理:

1) 凍存細胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完quan培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完quan培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完quan培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)yi蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完quan培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

鏡像綺點(上海)細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù):

一、原代細胞服務(wù)
      各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源;
      多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源;
      原代細胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等;
      原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實驗外包服務(wù);

二、細胞株/系服務(wù)
      細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關(guān)說明書;
      細胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導(dǎo);
      細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關(guān)生長因子、試劑等;

三、iPS細胞
      iPS細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在);
      iPS細胞增殖及冷凍保存;
      iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習(xí);
      新藥及實驗儀器上市前評估;

四、技術(shù)外包服務(wù):各類細胞生物學(xué)實驗、分子生物學(xué)實驗、顯微鏡拍照服務(wù)等

五、其他:根據(jù)客戶需要定制服務(wù)等


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